Matching Pairs Lab citogenetica, molecular, los cromosomas, etcOnline version Biología molecular y citogenética by Mayerlys Ortega 1 Personal administrativo 2 Personal técnico 3 Personal de prácticas 4 Facultativos 5 Responsable de citogenética 6 Personal auxiliar 7 Los laboratorios de citogenética 8 Director de laboratorio Recepción y el procesamiento de las muestras, gestión del stock de materiales y la esterilización del material. Realiza tareas no específicas del laboratorio, pero importantes para su mantenimiento, como la limpieza. Son científicos con titulaciones superiores del área sanitaria y con experiencia en las tareas que se realizan en el laboratorio. Son los encargados de interpretar los resultados obtenidos y emitir informes en los que se plasmen los valores y las conclusiones de los análisis Es el responsable de coordinar y supervisar las tareas que se llevan a cabo en el laboratorio y en sus distintas ramas. Se encargan de estudiar los cromosomas de las muestras para detectar o descartar la presencia de anomalías En proceso de formación y que, por tanto, requerirá de mayor supervisión en su trabajo para aprender y dominar las técnicas que requiere. Encargados de la preparación de informes, la organización de registros y el contacto con los clientes. 1 ISO 15189 2 Zona de recepción y conservación de muestras 3 Zona de preparación y cultivo 4 Área técnica 5 Área de estudio 6 Zona de conservación de muestras procesadas 7 Zona de procesamiento 8 Zona de bandeo Establece las áreas que debe tener un laboratorio de citogen Es aquella en la que se reciben las muestras, se conservan y se trabaja con ellas para su estudio posterior. Se realiza un procesado de las células obtenidas en cultivos celulares para poder observar los cromosomas y prepararlos para aplicar otras técnicas. Cuando ya se ha realizado el procesamiento de las muestras, almacenarlas para su posterior estudio Este almacenamiento se realiza en esta zona. Se recibirán las muestras, se registrarán y se almacenarán de manera adecuada para su tratamiento. Zona reservada a la tinción las muestras procesadas para poder observar y diferenciar los cromosomas. Para ello se utilizan colorantes y cubetas. Se trata de la zona en la que comienza el trabajo de lab, ya que es donde se realizará el pretratamiento de la muestra y los cultivos celulares. Análisis de muestras con microscopio, búsqueda de metafases, cariotipado, recuento cromosómico e informes. 1 Tubos truncados 2 Cariotipadores 3 Los laboratorios de citogenética deben contar con una serie de materiales de laboratorio para poder realizar las tareas 4 Frascos Roux 5 Contenedores de muestras Balanzas, matraces, cabinas de flujo laminar, centrifugadoras, microscopios ópticos, pHmetros, incubadoras y otros Microscopio óptico con cámara y software que identifica y empareja cromosomas de forma rápida y automática a partir de imágenes. Botellas cuadradas con tapones enroscables. Tienen la ventaja de ser apilables, por lo que facilitan el almacenamiento de cultivos. Son tubos de ensayo modificados, con un lado plano para mantenerse en posición semiacostada. Se utilizan cuando se trabaja cantidades bajas de muestra Son recipientes que contienen sustancias anticoagulantes que evitan que se deterioren las muestras de sangre o de médula ósea. 1 Área de amplificación 2 Área neutra 3 Procesos que lleva a cabo el laboratorio de biología molecular 4 Área de post-amplificación 5 Lab Biología molecular 6 Área técnica de preamplificación pre-PCR Se analiza el ADN amplificado con técnicas como hibridación, electroforesis o secuenciación, usando equipos específicos. Organización secuencial. Cuentan con director - área de preamplificación pre-pcr, amplificación, post-amp, área neutra. Aquí se preparan reactivos y se analizan datos, con material básico y ordenadores para interpretar resultados. Recepción de muestras, separación de muestras, extracción de material genético, análisis e interpretación. Se realizan pruebas de PCR usando termocicladores para obtener ADN amplificado y cuantificable desde una muestra. Procesa muestras antes de la PCR: separación celular, extracción de ADN/ARN y pretratamiento para amplificación. 1 Transiluminadores de luz UV 2 Termocicladores 3 Secuenciadores 4 Medidas de esterilización 5 Medidas personales en laboratorio 6 Tubos Eppendorf 7 Cubetas de electroforesis 8 Riesgos en los laboratorios de citogenética y biología molecular 9 Las principales fuentes de contaminación en un laboratorio Máquinas que determinan la secuencia de ADN de una muestra; su uso va en aumento por su mejora en accesibilidad. Manos limpias, guantes, bata, cabello recogido, sin joyas, orden, sin corrientes de aire y mínima gente en zona de cultivo. Son los trabajadores, el material del laboratorio, los instrumentos, los medios de cultivo e incluso las mismas muestras. Físicos, químicos y biológicos. Aparatos que aplican cambios rápidos de temperatura a muestras para realizar PCR; esenciales en biología molecular. Radiación, filtración, calor, antibióticos. Son plataformas con una base transparente sobre las que aplican luz ultravioleta que permite observar las bandas de las electroforesis de manera clara Son tubos de ensayo de pequeño tamaño con una tapa integrada y que se utilizan mucho en el laboratorio de biología molecular. Recipientes donde se aplican corrientes eléctricas a geles con ADN para separarlo según su tamaño por electroforesis. 1 Residuos de tipo II 2 Residuos de tipo VI 3 Residuos de tipo III 4 Residuos de tipo I 5 Residuos de tipo V 6 Residuos de tipo IV 7 Residuos de tipo VII Residuos especiales que requieren medidas especiales de prevención, recogida, almacenamiento, transporte y/o eliminación Cadáveres Residuos químicos Residuos citotóxicos Residuos asimilables a los urbanos, incluyendo algunos residuos biosanitarios no incluidos en la clase III Residuos generales: cartón, papel, comida, vidrio, etc. Residuos contaminados por sustancias radiactivas 1 Mantenimiento del Ph de las células 2 Tipo de muestra 3 Células totipotenciales 4 Estado de las células 5 Células pluripotenciales 6 Células Procariotas 7 Células diferenciadas 8 Células Eucariotas Cultivos de líquido amniótico, vellosidad corial y sangre periférica Pueden dar lugar a varios tipos celulares, pero no a cualquiera Cultivos en suspensión y en monocapa Células ya definidas que no pueden dar lugar a un tipo de células diferentes la propio Cultivos microbiológicos Pueden dar lugar a cualquier tipo de células que forman parte del organismo Cultivos celulares Cultivos cerrados y abiertos 1 Cámara de Recuento Thoma 2 Medidas a tomar cuando se produce contaminación 3 Fijación y tinción 4 Sacrificio 5 Tripsinización (Sacrificio) 6 Cámara de Recuento Neubauer. (La más común) 7 Cámara de Recuento Lemaur 8 Cultivos celulares Tiene una retícula con 9 grandes cuadrados (1 mm² cada uno), subdivididos en 16 pequeños cuadrados. Las células mueren dejando su material genético intacto Su retícula es más grande, con divisiones más espaciadas. Se usa para contar glóbulos rojos y leucocitos en sangre Unas 24 horas antes del sacrificio se añade tripsina al medio de cultivo para que las células se despeguen de las paredes del recipiente Presenta una retícula detallada, útil para recuentos precisos de células eucariotas o cultivos celulares más complejos. A partir de una muestra se obtienen células viables Descartar medios de cultivo contaminados, localizar el origen y avisar a los proveedores SI el origen está en sus productos. Los cromosomas se unen a un soporte y se tiñen para distinguirse fácilmente 1 Centrómero 2 Método Seco o FLAMBEADO 3 Método húmedo 4 BANDEO C (CGB) 5 BANDEO G (CTG) 6 Fijación y extensión (MÉTODOS) 7 NOR 8 Telómeros 9 Cromátidas Giemsa + Tripsina , ZONAS TEÑIDAS RICAS EN A-T Método húmedo y seco flambeado Son las extremos de los cromosomas, que protegen las cromátidas de la pérdida de información durante las divisiones celulares. Son las dos mitades de un cromosoma después de la replicación del ADN, unidas por el cromosoma. Nitrato de plata (AgNO3) ZONAS TEÑIDAS REGIONES ORGANIZADORES DE NUCLEOLARES Realiza pasando el portaobjetos rápidamente por la llama de un mechero Bunsen, procurando que no se calienten en exceso Giemsa + Ácido clorhídrico (HCl) e hidróxido de bario (Ba(OH)2) ZONAS TEÑIDAS LOS CENTROMEROS Es la región que une las cromátidas hermanas y donde se anclan durante la división celular. Dejar sobre el portaobjetos tres gotas de solución con fijador y dejar que se evaporen 1 Triploidías 2 Aneuploidías: 3 Monosomías: 4 Trisomías: 5 Euploidías 6 Tetraploidías Se ha ganado un juego de cromosomas, por lo que tienen una dotación de 3n (69 cromosomas). Consisten en la pérdida de un cromosoma de la dotación total, la dotación quedará en 2n-1 (45 cromosomas). han perdido o ganado uno o más cromosomas independientemente del resto. Se ha producido la ganancia de un cromosoma extra para un par cromosómico, dando una dotación 2n+1 (47 cromosomas En este caso, se encuentran una dotación doble de cromosomas, es decir, 4n (92 cromosomas). Son alteraciones numéricas en las que los individuos han ganado uno o más juegos completos de cromosomas con respecto a las personas sanas.
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