Tras el banquete, José ordena llenar los sacos de sus hermanos con alimento, devolver el dinero en cada saco y esconder su copa personal de plata en el saco de Benjamín. Al despuntar el alba, los hermanos parten satisfechos, pero a poca distancia son alcanzados por el mayordomo de José, quien los acusa de haber pagado mal por bien robando la copa sagrada. Los hermanos, seguros de su inocencia, proponen un castigo drástico: aquel en cuyo saco se halle la copa morirá, y los demás serán esclavos.
El mayordomo ajusta las condiciones de la prueba: solo el culpable será esclavo y los demás quedarán libres. Se inicia la inspección comenzando por el hermano mayor (Rubén) hasta el menor. La copa aparece en el saco de Benjamín. Destrozados, los hermanos rasgan sus vestidos y regresan a la ciudad. Ante José, caen en tierra y Judá pronuncia un discurso extraordinario: reconoce que Dios ha sacado a la luz sus faltas pasadas. Cuando José insiste en que solo retenía a Benjamín como esclavo y que los demás podían irse en paz, Judá se acerca, le explica el dolor que esto le causaría a su anciano padre Jacob y le ruega quedarse él como esclavo perpetuo en lugar del joven.