Quiz: Segundo cort


Segundo cortOnline version estud by 0532220006 LINA MARIA CUADRADO TORRES ESTUDIANTE ACTIVO 1 ¿Con qué fin se fusionan los linfocitos B con células tumorales (mielomas) para la producción de anticuerpos monoclonales? a Para aumentar la síntesis de ATP b Para modificar el ADN bacteriano c Para otorgarles inmortalidad y mantener la línea celular in vitro d Para producir endotoxinas 2 El ARN mensajero de un organismo eucariotico se extrae y se transcribe inversamente a ADN luego se dirige con enzimas de restriccion y los fragmentos resultantes se clonan en un vetor plasmidico. las bacterias transformadas por estos plasmidos contienen la informacion de los transcriptos que codifican las proteinas de ese organismo. este cultivo de bacterias transformadas se considera un(a): a mapa de restriccion b perfil de RFLP c Biblioteca de ADN complementario d Biblioteca de ADN genomico e fagot lisogenico 3 Existen 64 combinaciones posibles de codones que codifican los 20 aminoacidos presentes en la naturalez. por lo tanto puede ocurrir que varios aminoacidos sean codificados por un solo codon. segun la anterior informacion se considera el codigo genetico como a reduccionista b recombinado c degenerado d ninguna de las anteriores 4 La tecnología del ADN recombinante, posibilitó la producción de proteínas mutantes, con variaciones o ausencias de algunos aminoácidos en la estructura primaria. ¿Qué tipo de mutaciones serían adecuadas para el diseño de una proteína hipoalergénica con uso potencial en inmunoterapia para las alergias? a Por medio de mutaciones en epítopes de IgE (zonas de reconocimiento de la IgE) b Por medio de mutaciones en aminoácidos no críticos de su estructura c Por medio de mutaciones en epítopes de células T d Por medio de mutaciones en aminoácidos del interior de la proteína e Todas las anteriores 5 ¿Por qué es importante realizar un mapeo interno de los sitios de restricción en la secuencia génica de interés, que busca ser digerida en sus extremos utilizando enzimas de restricción (Ej. Para la formación de extremos cohesivos)? a Para conocer las enzimas con fragmentos cohesivos exclusivos de dicho segmento (interno) b Para utilizar enzimas candidatas en la digestión de dicho segmento (interno) c Para evitar digerir la secuencia con endonucleasas de restricción que reconozcan dicho segmento (interno) d Para evitar utilizar enzimas de restricción que no reconozcan los extremos de la secuencia de interés 6 Establezca el orden esperado de desarrollo tecnológico en los siguientes anticuerpos monoclonales: del más reciente y novedoso al menos reciente. a Golimumab > Palivizumab > Cetuximab b Rituximab > Trastuzumab > Adalimumab c Adalimumab > Rituximab > Trastuzumab d Cetuximab > Golimumab > Palizumab 7 Explique la función de la región promotora de un operón bacteriano. Respuesta escrita 8 Según el “Dogma Central de la Biología”, se establece que la información genética fluye en el siguiente sentido (ver imagen): sin embargo en la naturaleza observamos que para la replicacion del ADN y transcripcion del ARN es necesario la presencia de enzimas (proteinas) segun la anterior afirmacion y que ademas tenia propiedades cataliticas que ayudo al origen de la vida actual? a ADN b ARN c Proteínas d Glúcidos 9 Explicar cómo pueden ser analizados los puentes disulfuro en una proteína y por qué es importante su análisis (explicar la técnica brevemente): Respuesta escrita 10 Diga las principales técnicas de laboratorio para evaluar la estructura secundaria de un bioproducto. Explicar las técnicas brevemente: Respuesta escrita 11 En la siguiente gráfica se observa la electroforesis de un experimento de producción de proteínas recombinantes, donde: A.I.: Antes de la inducción D.I.: Después de la inducción con IPTG. y Explique las diferencias existentes entre las lineas A.I. y D.I. Respuesta escrita 12 ¿Cuál de las siguientes herramientas y/o moléculas utilizadas en la tecnología de ADN recombinante se combina INCORRECTAMENTE con uno de sus usos? a Endonucleasa de restricción: Producción de fragmentos de ADN para la clonación de genes. b ADN ligasa: Enzima que crea extremos pegajosos o cohesivos en la secuencia de ADN para ligarlos c ADN polimerasa: Copia secuencias de ADN en la reacción en cadena de la polimerasa. d Transcriptasa inversa: Producción de ADNc a partir de ARNm. e Electroforesis: Análisis del peso molecular de proteínas o ADN 13 ¿Cuál es la diferencia básica entre la producción de insulina recombinante humana (utilizando bacterias) y la realizada en células de mamíferos? a La cadena alfa y la cadena beta se producen en la misma célula bacteriana b La cadena alfa y la cadena beta se producen en segmentos diferentes del mismo plásmido de la bacteria c La cadena alfa y la cadena beta se producen en células bacterianas separadas d La cadena alfa y la cadena beta se fusionan a un gen de resistencia a Ampicilina en un plásmido de la célula/bacteria 14 Explique detalladamente la función del complejo del níquel en la purificación de proteínas con tag de Histidina (en inglés: etiqueta). Respuesta escrita 15 Para la obtención de una proteína recombinante en E. coli, se realizó la inserción de su secuencia génica en un vector plasmídico pGEM-T, con sitios de restricción en la secuencia del gen LacZ. En la práctica, ¿cómo podrían identificarse los plásmidos que fueron fusionados o recombinados (pGEM-T + gen de interés farmacéutico)? a Identificando con sondas marcadas con fluorocromos específicas para el vector b Utilizando un medio de cultivo con ampicilina c Utilizando un medio de cultivo con galactosa d Identificando el producto farmacéutico con marcadores de fluorescencia e Utilizando un medio de cultivo con tetraciclina y rico en lactosa 16 ¿Cuál de las siguientes moléculas y/o procedimientos NO es parte del proceso normal de clonación de un genoma de mamífero utilizando bacterias? a Digestión por endonucleasas de restricción del ADN genómico y plásmidos. b Separación del ADN recombinante por hibridación usando sondas para purificarlo c Producción de ADN recombinante usando ADN ligasa y una mezcla de ADN celular y plásmido digeridos. d Transformación de bacterias por los plásmidos de ADN recombinante y selección usando ampicilina. e Detección de los clones de bacterias utilizando sondas de ADN conjugadas con compuestos radiactivos o fluorocromos complementarias al gen deseado. 17 ¿Cuál de las siguientes afirmaciones es la INCORRECTA respecto a la electroforesis en gel de poliacrilamida SDS-PAGE? a El peso molecular de las muestras proteicas desconocidas se puede determinar con un patrón conocido b Sirve para separar moléculas de proteínas de acuerdo a su peso molecular c Sirve para separar proteínas cargadas positiva y negativamente con SDS d Sirve para verificar la pureza relativa de una proteína purificada 18 En la técnica de separación de proteínas recombinantes por afinidad utilizando anticuerpos monoclonales, ¿cuál es la función del ácido débil empleado al final de la técnica? Respuesta escrita 19 ¿Qué es el marco de lectura de un gen y qué consecuencias trae el desplazamiento del mismo? Respuesta escrita 20 ¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por intercambio iónico? Explicar paso a paso la técnica. Respuesta escrita 21 ¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por filtración por gel? Respuesta escrita 22 ¿Por qué algunas de las proteínas recombinantes de uso terapéutico con secuencias nativas (sin modificaciones estructurales) NO son buenos medicamentos (producto listo para el uso en pacientes)? Respuesta escrita 23 ¿Cuál es la función de la Lactosa/IPTG en la regulación de la expresión génica y producción de proteínas recombinantes en procariotas? a Inactivar los genes estructurales en el operón b Aumentar la biodisponibilidad de la proteína represora c Activar la proteína represora o reguladora de la transcripción en el operón d Inactivar la proteína represora o reguladora de la transcripción en el operón 24 ¿Cuáles son las principales funciones de los glúcidos en los anticuerpos monoclonales y qué consecuencias trae las alteraciones de dichos patrones de glicosilación? Respuesta escrita 25 ¿Cuál es la utilidad del proceso de armonización de codones en expresión génica heteróloga de proteínas recombinantes? Respuesta escrita 26 Mencione al menos 3 modificaciones genéticas realizadas a cepas bacterianas para su uso en la producción de proteínas recombinantes: Respuesta escrita

1

¿Con qué fin se fusionan los linfocitos B con células tumorales (mielomas) para la producción de anticuerpos monoclonales?

a

Para aumentar la síntesis de ATP

b

Para modificar el ADN bacteriano

c

Para otorgarles inmortalidad y mantener la línea celular in vitro

d

Para producir endotoxinas

2

El ARN mensajero de un organismo eucariotico se extrae y se transcribe inversamente a ADN luego se dirige con enzimas de restriccion y los fragmentos resultantes se clonan en un vetor plasmidico. las bacterias transformadas por estos plasmidos contienen la informacion de los transcriptos que codifican las proteinas de ese organismo. este cultivo de bacterias transformadas se considera un(a):

a

mapa de restriccion

b

perfil de RFLP

c

Biblioteca de ADN complementario

d

Biblioteca de ADN genomico

e

fagot lisogenico

3

Existen 64 combinaciones posibles de codones que codifican los 20 aminoacidos presentes en la naturalez. por lo tanto puede ocurrir que varios aminoacidos sean codificados por un solo codon. segun la anterior informacion se considera el codigo genetico como

a

reduccionista

b

recombinado

c

degenerado

d

ninguna de las anteriores

4

La tecnología del ADN recombinante, posibilitó la producción de proteínas mutantes, con variaciones o ausencias de algunos aminoácidos en la estructura primaria. ¿Qué tipo de mutaciones serían adecuadas para el diseño de una proteína hipoalergénica con uso potencial en inmunoterapia para las alergias?

a

Por medio de mutaciones en epítopes de IgE (zonas de reconocimiento de la IgE)

b

Por medio de mutaciones en aminoácidos no críticos de su estructura

c

Por medio de mutaciones en epítopes de células T

d

Por medio de mutaciones en aminoácidos del interior de la proteína

e

Todas las anteriores

5

¿Por qué es importante realizar un mapeo interno de los sitios de restricción en la secuencia génica de interés, que busca ser digerida en sus extremos utilizando enzimas de restricción (Ej. Para la formación de extremos cohesivos)?

a

Para conocer las enzimas con fragmentos cohesivos exclusivos de dicho segmento (interno)

b

Para utilizar enzimas candidatas en la digestión de dicho segmento (interno)

c

Para evitar digerir la secuencia con endonucleasas de restricción que reconozcan dicho segmento (interno)

d

Para evitar utilizar enzimas de restricción que no reconozcan los extremos de la secuencia de interés

6

Establezca el orden esperado de desarrollo tecnológico en los siguientes anticuerpos monoclonales: del más reciente y novedoso al menos reciente.

a

Golimumab > Palivizumab > Cetuximab

b

Rituximab > Trastuzumab > Adalimumab

c

Adalimumab > Rituximab > Trastuzumab

d

Cetuximab > Golimumab > Palizumab

7

Explique la función de la región promotora de un operón bacteriano.

Respuesta escrita

8

Según el “Dogma Central de la Biología”, se establece que la información genética fluye en el siguiente sentido (ver imagen): sin embargo en la naturaleza observamos que para la replicacion del ADN y transcripcion del ARN es necesario la presencia de enzimas (proteinas) segun la anterior afirmacion y que ademas tenia propiedades cataliticas que ayudo al origen de la vida actual?

a

ADN

b

ARN

c

Proteínas

d

Glúcidos

9

Explicar cómo pueden ser analizados los puentes disulfuro en una proteína y por qué es importante su análisis (explicar la técnica brevemente):

Respuesta escrita

10

Diga las principales técnicas de laboratorio para evaluar la estructura secundaria de un bioproducto. Explicar las técnicas brevemente:

Respuesta escrita

11

En la siguiente gráfica se observa la electroforesis de un experimento de producción de proteínas recombinantes, donde: A.I.: Antes de la inducción D.I.: Después de la inducción con IPTG. y Explique las diferencias existentes entre las lineas A.I. y D.I.

Respuesta escrita

12

¿Cuál de las siguientes herramientas y/o moléculas utilizadas en la tecnología de ADN recombinante se combina INCORRECTAMENTE con uno de sus usos?

a

Endonucleasa de restricción: Producción de fragmentos de ADN para la clonación de genes.

b

ADN ligasa: Enzima que crea extremos pegajosos o cohesivos en la secuencia de ADN para ligarlos

c

ADN polimerasa: Copia secuencias de ADN en la reacción en cadena de la polimerasa.

d

Transcriptasa inversa: Producción de ADNc a partir de ARNm.

e

Electroforesis: Análisis del peso molecular de proteínas o ADN

13

¿Cuál es la diferencia básica entre la producción de insulina recombinante humana (utilizando bacterias) y la realizada en células de mamíferos?

a

La cadena alfa y la cadena beta se producen en la misma célula bacteriana

b

La cadena alfa y la cadena beta se producen en segmentos diferentes del mismo plásmido de la bacteria

c

La cadena alfa y la cadena beta se producen en células bacterianas separadas

d

La cadena alfa y la cadena beta se fusionan a un gen de resistencia a Ampicilina en un plásmido de la célula/bacteria

14

Explique detalladamente la función del complejo del níquel en la purificación de proteínas con tag de Histidina (en inglés: etiqueta).

Respuesta escrita

15

Para la obtención de una proteína recombinante en E. coli, se realizó la inserción de su secuencia génica en un vector plasmídico pGEM-T, con sitios de restricción en la secuencia del gen LacZ. En la práctica, ¿cómo podrían identificarse los plásmidos que fueron fusionados o recombinados (pGEM-T + gen de interés farmacéutico)?

a

Identificando con sondas marcadas con fluorocromos específicas para el vector

b

Utilizando un medio de cultivo con ampicilina

c

Utilizando un medio de cultivo con galactosa

d

Identificando el producto farmacéutico con marcadores de fluorescencia

e

Utilizando un medio de cultivo con tetraciclina y rico en lactosa

16

¿Cuál de las siguientes moléculas y/o procedimientos NO es parte del proceso normal de clonación de un genoma de mamífero utilizando bacterias?

a

Digestión por endonucleasas de restricción del ADN genómico y plásmidos.

b

Separación del ADN recombinante por hibridación usando sondas para purificarlo

c

Producción de ADN recombinante usando ADN ligasa y una mezcla de ADN celular y plásmido digeridos.

d

Transformación de bacterias por los plásmidos de ADN recombinante y selección usando ampicilina.

e

Detección de los clones de bacterias utilizando sondas de ADN conjugadas con compuestos radiactivos o fluorocromos complementarias al gen deseado.

17

¿Cuál de las siguientes afirmaciones es la INCORRECTA respecto a la electroforesis en gel de poliacrilamida SDS-PAGE?

a

El peso molecular de las muestras proteicas desconocidas se puede determinar con un patrón conocido

b

Sirve para separar moléculas de proteínas de acuerdo a su peso molecular

c

Sirve para separar proteínas cargadas positiva y negativamente con SDS

d

Sirve para verificar la pureza relativa de una proteína purificada

18

En la técnica de separación de proteínas recombinantes por afinidad utilizando anticuerpos monoclonales, ¿cuál es la función del ácido débil empleado al final de la técnica?

Respuesta escrita

19

¿Qué es el marco de lectura de un gen y qué consecuencias trae el desplazamiento del mismo?

Respuesta escrita

20

¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por intercambio iónico? Explicar paso a paso la técnica.

Respuesta escrita

21

¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por filtración por gel?

Respuesta escrita

22

¿Por qué algunas de las proteínas recombinantes de uso terapéutico con secuencias nativas (sin modificaciones estructurales) NO son buenos medicamentos (producto listo para el uso en pacientes)?

Respuesta escrita

23

¿Cuál es la función de la Lactosa/IPTG en la regulación de la expresión génica y producción de proteínas recombinantes en procariotas?

a

Inactivar los genes estructurales en el operón

b

Aumentar la biodisponibilidad de la proteína represora

c

Activar la proteína represora o reguladora de la transcripción en el operón

d

Inactivar la proteína represora o reguladora de la transcripción en el operón

24

¿Cuáles son las principales funciones de los glúcidos en los anticuerpos monoclonales y qué consecuencias trae las alteraciones de dichos patrones de glicosilación?

Respuesta escrita

25

¿Cuál es la utilidad del proceso de armonización de codones en expresión génica heteróloga de proteínas recombinantes?

Respuesta escrita

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¿Con qué fin se fusionan los linfocitos B con células tumorales (mielomas) para la producción de anticuerpos monoclonales?

Existen 64 combinaciones posibles de codones que codifican los 20 aminoacidos presentes en la naturalez. por lo tanto puede ocurrir que varios aminoacidos sean codificados por un solo codon. segun la anterior informacion se considera el codigo genetico como

¿Por qué es importante realizar un mapeo interno de los sitios de restricción en la secuencia génica de interés, que busca ser digerida en sus extremos utilizando enzimas de restricción (Ej. Para la formación de extremos cohesivos)?

Establezca el orden esperado de desarrollo tecnológico en los siguientes anticuerpos monoclonales: del más reciente y novedoso al menos reciente.

Explique la función de la región promotora de un operón bacteriano.

Explicar cómo pueden ser analizados los puentes disulfuro en una proteína y por qué es importante su análisis (explicar la técnica brevemente):

Diga las principales técnicas de laboratorio para evaluar la estructura secundaria de un bioproducto. Explicar las técnicas brevemente:

En la siguiente gráfica se observa la electroforesis de un experimento de producción de proteínas recombinantes, donde: A.I.: Antes de la inducción D.I.: Después de la inducción con IPTG. y Explique las diferencias existentes entre las lineas A.I. y D.I.

¿Cuál de las siguientes herramientas y/o moléculas utilizadas en la tecnología de ADN recombinante se combina INCORRECTAMENTE con uno de sus usos?

¿Cuál es la diferencia básica entre la producción de insulina recombinante humana (utilizando bacterias) y la realizada en células de mamíferos?

Explique detalladamente la función del complejo del níquel en la purificación de proteínas con tag de Histidina (en inglés: etiqueta).

¿Cuál de las siguientes moléculas y/o procedimientos NO es parte del proceso normal de clonación de un genoma de mamífero utilizando bacterias?

¿Cuál de las siguientes afirmaciones es la INCORRECTA respecto a la electroforesis en gel de poliacrilamida SDS-PAGE?

En la técnica de separación de proteínas recombinantes por afinidad utilizando anticuerpos monoclonales, ¿cuál es la función del ácido débil empleado al final de la técnica?

¿Qué es el marco de lectura de un gen y qué consecuencias trae el desplazamiento del mismo?

¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por intercambio iónico? Explicar paso a paso la técnica.

¿Cuál es el fundamento teórico de la técnica de separación de proteínas por filtración por gel?

¿Por qué algunas de las proteínas recombinantes de uso terapéutico con secuencias nativas (sin modificaciones estructurales) NO son buenos medicamentos (producto listo para el uso en pacientes)?

¿Cuál es la función de la Lactosa/IPTG en la regulación de la expresión génica y producción de proteínas recombinantes en procariotas?

¿Cuáles son las principales funciones de los glúcidos en los anticuerpos monoclonales y qué consecuencias trae las alteraciones de dichos patrones de glicosilación?

¿Cuál es la utilidad del proceso de armonización de codones en expresión génica heteróloga de proteínas recombinantes?

Mencione al menos 3 modificaciones genéticas realizadas a cepas bacterianas para su uso en la producción de proteínas recombinantes: