ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 06 EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE ADN

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Magalys Monasteios

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ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 06 EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE ADN


ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 06 EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE ADNOnline version Preuniversitario by Magalys Monasteios 1 ¿Cuál es la función principal del ADN en las células? a Transportar nutrientes dentro de la célula b Producir energía para las células mediante la respiración celular. c Formar la membrana celular y proteger la célula de agentes externos. d Dirigir todas las actividades celulares y determinar el plan de desarrollo de los organismos multicelulares. 2 ¿Qué avance permitió estudiar genomas eucariotas complejos y comprobar funciones de genes? a La clonación de genes mediante técnicas de ADN recombinante. b La observación directa de células al microscopio óptico. c La síntesis química de proteínas en laboratorio. d La secuenciación de proteínas mediante espectrometría de masas. 3 ¿Qué característica tiene la estructura tridimensional del ADN descubierta por Watson y Crick? a Es una cadena simple enrollada en forma de espiral. b Es una doble hélice con el esqueleto azúcar-fosfato en el exterior y bases nitrogenadas en el interior. c Está formada por una hélice simple con bases expuestas al exterior. d Es una estructura plana con bases nitrogenadas en la superficie. 4 ¿Qué bases nitrogenadas se aparean específicamente en el ADN? a Adenina con Citosina y Guanina con Timina. b Adenina con Guanina y Timina con Citosina. c Adenina con Timina y Guanina con Citosina. d Adenina con Adenina y Guanina con Guanina. 5 ¿Qué método clásico se utiliza para la purificación de ácidos nucleicos? a Extracción mediante fenol/cloroformo. b Centrifugación en gradiente de densidad. c Electroforesis en gel de agarosa. d Secuenciación por síntesis. 6 ¿Qué ventaja tiene la purificación salina frente a la extracción con disolventes orgánicos? a Es más rápida pero menos pura que la extracción con fenol. b Evita la toxicidad de los disolventes orgánicos y desproteina eficazmente. c No requiere la eliminación de ARN ni proteínas. d Solo funciona con muestras de tejido vegetal. 7 ¿Cuál es uno de los principales criterios para evaluar la calidad del ADN extraído? a La pureza y calidad del ADN para obtener resultados confiables. b El color del ADN extraído. c La cantidad de proteínas presentes en la muestra. d La viscosidad del líquido extraído. 8 ¿Cuál es una aplicación del ADN purificado en biología molecular? a Medir la presión sanguínea en pacientes. b Identificar mutaciones y estudiar polimorfismos c Determinar la temperatura de ebullición de líquidos d Calcular la masa corporal de organismo 9 ¿Qué paso inicial se realiza en el protocolo de extracción de ADN? a Electroforesis del ADN sin extracción previa. b Secuenciación directa del ADN sin preparación previa. c Cultivo de células en medio nutritivo. d Lisis celular mediante trituración para homogenizar componentes celulares. 10 ¿Cuál es la función del ácido tricloroacético en el protocolo de extracción? a Rompe las membranas celulares para liberar el ADN. b Sirve para precipitar el ADN directamente. c Disuelve las proteínas contaminantes. d Actúa como fijador para preservar la integridad del ADN. 11 ¿Para qué se utiliza la solución salina con NaCl en el protocolo? a Para teñir el ADN y facilitar su visualización. b Para disolver el ADN en la muestra. c Para eliminar el ARN presente en la muestra. d Para precipitar proteínas y otros contaminantes celulares. 12 ¿Cuál es el propósito de agregar alcohol frío a la muestra caliente durante la extracción? a Precipitar el ADN para su aislamiento visual. b Disolver las proteínas contaminantes. c Eliminar el ARN residual de la muestra. d Neutralizar el pH de la solución. 13 ¿Qué método espectrofotométrico se usa para cuantificar el ADN? a Medición de fluorescencia a 500 nm para detectar proteínas. b Medición de absorbancia a 260 nm y 280 nm para determinar concentración y pureza. c Medición de absorbancia a 600 nm para evaluar células vivas. d Medición de conductividad eléctrica de la muestra. 14 ¿Qué indica un cociente A260/A280 menor a 1,8 en una muestra de ADN? a Presencia exclusiva de ARN en la muestra. b Alta pureza del ADN sin contaminantes. c Contaminación con proteínas o fenol u otros contaminantes. d Contaminación con carbohidratos y péptidos. 15 ¿Qué significa una absorción a 230 nm en la espectrofotometría de ADN? a Alta concentración de proteínas en la muestra. b Presencia exclusiva de ADN puro sin contaminantes. c Contaminación con hidratos de carbono, péptidos, fenoles u otros compuestos. d Presencia de sales inorgánicas en la solución. 16 ¿Cuál es el valor aproximado del cociente A260/A230 para muestras puras de ADN? a 0,5 b 1,0 c 2,2 d 3,5 17 ¿Qué conocimiento previo es importante para realizar la práctica de extracción de ADN? a Química orgánica avanzada y síntesis de proteínas. b Técnicas de cultivo celular y microscopía electrónica c Estructura y composición del ADN, métodos de extracción y principios de espectrofotometría. d Bioestadística y análisis de datos clínicos. 18 ¿Qué material biológico se utiliza en el protocolo experimental para extraer ADN? a Hígado fresco. b Sangre seca. c Células de piel humana. d Levadura en cultivo. 19 ¿Cuál es la función del macerado en la extracción de ADN? a Romper el tejido para homogenizar los componentes celulares. b Eliminar las proteínas contaminantes. c Precipitar el ADN en la muestra. d Neutralizar el pH de la solución 20 ¿Qué se observa al agregar alcohol frío a la muestra caliente durante la extracción? a Cambio de color en la solución debido a la reacción química. b Disolución completa del ADN en la solución c Formación de precipitados proteicos. d Formación de hebras de ADN en la interfase entre alcohol y muestra. 21 ¿Qué tipo de enlaces mantienen unidas las dos cadenas de nucleótidos en el ADN? a Enlaces iónicos entre nucleótidos. b Enlaces covalentes entre azúcares y fosfatos. c Puentes de hidrógeno entre bases nitrogenadas complementarias d Enlaces peptídicos entre bases nitrogenadas 22 ¿Qué técnica se utiliza para eliminar el ARN presente en la muestra durante la extracción? a Uso de fenol/cloroformo. b Tratamiento con ARNasa. c Precipitación con alcohol frío. d Filtración a través de papel. 23 ¿Qué ventaja tienen los kits comerciales para extracción de ADN? a Son más tóxicos que los métodos tradicionales. b Garantizan calidad y reducen costos por competencia comercial. c No requieren conocimientos previos para su uso. d Solo funcionan con muestras de sangre. 24 ¿Qué indica la ley de Lambert-Beer en la cuantificación de ADN? a La absorbancia solo depende de la longitud de onda, no de la concentración b La absorbancia es inversamente proporcional a la concentración del soluto. c La absorbancia no depende de la concentración del soluto. d La absorbancia es proporcional a la concentración del soluto y al paso de luz. Explicación 1 El ADN proporciona un patrón que dirige todas las actividades celulares y determina el plan de desarrollo de los organismos multicelulares, siendo el material genético fundamental. 2 El desarrollo e implementación de técnicas para la clonación de genes permitió estudiar genomas eucariotas complejos y comprobar funciones de genes. 3 El ADN está constituido por una doble hélice con el esqueleto azúcar-fosfato en el exterior y las bases nitrogenadas en el interior, según el modelo de Watson y Crick. 4 El apareamiento específico de bases en el ADN es adenina con timina (A-T) y guanina con citosina (G-C), manteniendo la complementariedad. 5 El método clásico para purificar ácidos nucleicos es la extracción mediante fenol/cloroformo, que desproteina la muestra. 6 La purificación salina usa alta concentración salina para desproteinizar sin toxicidad, evitando los inconvenientes de los disolventes orgánicos. 7 La calidad y pureza del ADN son fundamentales para el éxito en su utilización y para obtener resultados confiables. 8 El ADN purificado se usa para identificar mutaciones, estudiar polimorfismos, clonar genes, entre otras aplicaciones moleculares 9 El primer paso es la lisis celular mediante trituración para romper las células y homogenizar sus componentes. 10 El ácido tricloroacético se usa como fijador para preservar la integridad del ADN durante la extracción. 11 La solución salina con NaCl se usa para precipitar proteínas y otros contaminantes, facilitando la purificación del ADN. 12 El alcohol frío se añade para precipitar el ADN, permitiendo observar las hebras formadas en la interfase. 13 La cuantificación del ADN se realiza midiendo la absorbancia a 260 nm para concentración y el cociente 260/280 para pureza. 14 Un cociente menor a 1,8 indica contaminación con proteínas, fenol u otras sustancias que afectan la pureza del ADN. 15 La absorción a 230 nm indica contaminación con hidratos de carbono, péptidos, fenoles u otros compuestos aromáticos. 16 El cociente A260/A230 para muestras puras es aproximadamente 2,2, indicando baja contaminación con compuestos aromáticos o carbohidratos. 17 Es fundamental conocer la estructura del ADN, métodos de extracción y principios básicos de espectrofotometría para realizar la práctica. 18 El protocolo experimental utiliza hígado fresco como material biológico para la extracción de ADN. 19 El macerado sirve para triturar el tejido y homogenizar los componentes celulares, facilitando la lisis y extracción del ADN. 20 Al agregar alcohol frío, el ADN precipita y se observan hebras en la interfase, indicativo de la presencia de ADN purificado. 21 Las dos cadenas de ADN se mantienen unidas por puentes de hidrógeno entre bases nitrogenadas complementarias (A-T y G-C). 22 El ARN se elimina mediante tratamiento con ARNasa, enzimas que degradan específicamente el ARN. 23 Los kits comerciales ofrecen garantía de calidad y han reducido sus precios, siendo una alternativa eficiente para extracción de ADN. 24 La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia es proporcional a la concentración del soluto y al camino óptico de la luz en la muestra.

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¿Cuál es la función principal del ADN en las células?

¿Qué avance permitió estudiar genomas eucariotas complejos y comprobar funciones de genes?

¿Qué característica tiene la estructura tridimensional del ADN descubierta por Watson y Crick?

¿Qué bases nitrogenadas se aparean específicamente en el ADN?

¿Qué método clásico se utiliza para la purificación de ácidos nucleicos?

¿Qué ventaja tiene la purificación salina frente a la extracción con disolventes orgánicos?

¿Cuál es uno de los principales criterios para evaluar la calidad del ADN extraído?

¿Cuál es una aplicación del ADN purificado en biología molecular?

¿Qué paso inicial se realiza en el protocolo de extracción de ADN?

¿Cuál es la función del ácido tricloroacético en el protocolo de extracción?

¿Para qué se utiliza la solución salina con NaCl en el protocolo?

¿Cuál es el propósito de agregar alcohol frío a la muestra caliente durante la extracción?

¿Qué método espectrofotométrico se usa para cuantificar el ADN?

¿Qué indica un cociente A260/A280 menor a 1,8 en una muestra de ADN?

¿Qué significa una absorción a 230 nm en la espectrofotometría de ADN?

¿Cuál es el valor aproximado del cociente A260/A230 para muestras puras de ADN?

¿Qué conocimiento previo es importante para realizar la práctica de extracción de ADN?

¿Qué material biológico se utiliza en el protocolo experimental para extraer ADN?

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